枸杞多糖檢測(cè)

時(shí)間：2023-03-24 01:48:40來(lái)源：food欄目：食品快速檢測(cè) 閱讀：

　　枸杞多糖的檢測(cè)方法　　1、方法原理 　　粗多糖在硫酸的作用下，水解成單糖，并迅速脫水生成糖醛衍生物，與苯酚　　縮合成有色化合物，用分光光度法測(cè)定樣品在粗多糖含量。　　2、主要設(shè)備和儀器試劑　　枸杞多糖標(biāo)準(zhǔn)液：精確稱(chēng)取105℃干燥恒重的標(biāo)準(zhǔn)枸杞多糖0.1000g，置100mL容量瓶中加熱蒸餾水溶解稀釋至刻度，其濃度為1.0mg/mL，用稀釋成濃度為0.1mg/mLd的標(biāo)準(zhǔn)工作液。　　5%苯酚溶液：取苯酚100g，沙浴蒸餾，收集180℃-182℃溜分，稱(chēng)取此餾分5g，用水溶解后，定容至100mL棕色容量瓶中備用（現(xiàn)用現(xiàn)配）。　　3、測(cè)定步驟3.1、最大吸收波長(zhǎng)的選擇　　精密吸取0.04mg/mL無(wú)水枸杞多糖溶1.0 　　mL，置10mL具塞試管中，加入蒸餾水使體積為2.0mL，再加苯酚試液1.0mL，搖勻，迅速滴加濃硫酸5.0mL，搖勻后放置5min，置沸水浴中加熱15min，取出后冷卻至室溫。以蒸餾水代替糖溶液如加上法配制空白。用721分光光度計(jì)在470-510nm測(cè)定吸光度，測(cè)定最大吸收波長(zhǎng)為490±nm。　　3.2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制　　精密吸收濃度為0.1mg/mL的枸杞多糖標(biāo)準(zhǔn)，標(biāo)準(zhǔn)工作液0、0.20、0.30、0.40、0.60、0.80mL，分別置于10mL具塞試管中，各加蒸餾水使體積為2.0mL，再加苯酚試液1.0mL，搖勻，迅速滴加濃硫酸5.0 　　mL，搖勻后放置5min，置沸水浴中加熱15min，取出后冷卻至室溫。以蒸餾水代替糖溶液如上法配制空白。用721分光光度計(jì)，1cm比色皿，在490nm處測(cè)定吸光度，繪制葡萄糖濃度-吸光度工作曲線。結(jié)果濃度在0.010-0.04mg/mL范圍內(nèi)與吸光度呈現(xiàn)性關(guān)系。　　回歸方程Y=7.52×10-3X+1.13×10-3, 　　Y=0.9997(n=6)。　　3.3、含量測(cè)定　　3.31、多糖的提取與精制　　取300mL，用氟仿多次萃取，以除去蛋白質(zhì)，加活性炭1%脫色，抽濾，濾液加入95%乙醇，使含醇量達(dá)80%，靜置過(guò)夜。過(guò)濾，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇、丙酮、乙醚多次洗滌，真空干燥，即得粗多糖。　　3.32、供試液的配制　　精密稱(chēng)取粗多糖粉末0.2000g，置于50mL容量瓶中，定容，搖勻，即得供試品溶液。　　3.33、樣品含量測(cè)定　　精密度吸取供試品溶液2.0mL，按“標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制”項(xiàng)下方法分別測(cè)定吸光度。4.結(jié)果計(jì)算

多糖含量（%）=（C·D）/V×100 　　式中：　　C－供試液葡萄糖濃度（mg/mL）；　　D－代試液的稀釋因素；　　V－供試液體積（mL）。