農(nóng)藥多殘留分析QuEChERS法

時間：2023-03-25 15:10:31來源：food欄目：食品快速檢測閱讀：

農(nóng)藥多殘留分析QuEChERS法

[db:作者] / 2022-11-28 00:00

QuEChERS方法是以一種快速、簡便、價格低廉的分析方法實現(xiàn)高質(zhì)量的農(nóng)藥多殘留分析。隨后的研究進一步證實有超過200種農(nóng)藥殘留可用該法分析，其中包括含脂肪的基質(zhì)體系。QuEChERS法較之傳統(tǒng)方法具有以下優(yōu)勢：①回收率高，對大量極性及揮發(fā)性的農(nóng)藥品種的回收率大于85%；②精確度和準(zhǔn)確度高，用內(nèi)標(biāo)法進行校正；③分析時間短，能在30～40min內(nèi)完成10～20個預(yù)先稱重的樣品測定；④溶劑使用量少，污染小且不使用含氯化物溶劑；⑤操作簡便，無須良好訓(xùn)練和較高技能便可很好地完成；⑥使用很少的玻璃器皿；⑦方法十分嚴格，在凈化過程中有機酸均被除去；⑧所需空間小，在小的、可移動的實驗室便可完成；⑨乙腈加到容器后立即密封，使其與工作人員的接觸機會少；⑩所耗費的溶劑價格低廉；?樣品制備過程中所使用的裝置簡單。其缺點是檢出限不夠低，凈化效果不理想，存在轉(zhuǎn)換上機溶劑的問題。

本方法后來衍生為歐盟方法(EN15662：2008)和美國AOAC方法(AOAC2007.01)。目前已經(jīng)在一些國家廣泛用于農(nóng)藥監(jiān)督機構(gòu)的評估和驗證試驗以及農(nóng)產(chǎn)品市場監(jiān)測。總體來說，此法使用單一的乙腈緩沖液進行浸提，再用無水硫酸鎂與檸檬酸鈉或醋酸鈉緩沖體系振蕩促使其分層；使用PSA(primary secondary amine)去除組分中的脂肪酸，無水硫酸鎂去除水分，得到的浸提液可用帶有MS檢測器的LC或GC進行農(nóng)藥多殘留分析。《蔬菜、水果中51種農(nóng)藥多殘留的測定氣相色譜-質(zhì)譜法》(NY/T1380-2007)是國內(nèi)最早采用QuEChERS方法進行前處理并使用分析保護劑補償基質(zhì)效應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)方法。2018年6月21日發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中208種農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法》(GB23200.113-2018)，是針對植物源性食品中多農(nóng)藥殘留分析的GC-MS/MS方法，有QuEChERS方法和SPE方法可選擇，方法測試了23種基質(zhì)，最終確定208種農(nóng)藥品種。

QuEChERS方法的步驟可以簡單歸納為：①樣品粉碎；②單一溶劑乙腈提取分離；③加入MgSO，等鹽類除水；④加入乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)等吸附劑除雜；⑤上清液進行GC-MS、LC-MS檢測。

表2-7 包括QuEChERS法樣品制備方法及依據(jù)GC-MS的最小檢出限(LOQ)列出可供選擇的兩種方法。a方案依靠LVl得到最小檢出限，b方案則是在不分流模式下采取樣品濃縮再用甲苯替換為增加注入樣品數(shù)量的方法獲得最低檢出限。

此法最后得到的乙腈浸提液濃度為1g/mL。在GC-MS達到小于10ng/g的檢測限時，需要8uL大體積進樣量或者對浸提液進行濃縮，再將溶劑置換成甲苯(4g/mL)。采用本方法，2uL不分流進樣即能達到預(yù)期的靈敏度。如果實驗室沒有MS，也可以根據(jù)分析要求選擇不同的檢測器。

要點討論：

(1)NaAc·3H2O可用無水NaAc替代，但每個樣品的無水NaAc的使用量為1.5g，而不是1g。

(2)無水MgSO4在使用前最好加熱至500℃(保持5h以上)，以去除鄰苯二甲酸酯和水分。

(3)氨丙基固相吸附劑可替代PSA，但每毫升浸提液用量為75g。

(4)對長期儲存(大于10年)的農(nóng)藥溶液來說，甲苯是最合適的溶劑。這主要是因為甲苯揮發(fā)性小，能與乙腈混溶，以及對農(nóng)藥的高溶解度和穩(wěn)定性。然而，并非所有農(nóng)藥在甲苯中的濃度均達10ng/mL。在某些情況下，乙腈、丙酮、甲醇以及乙酸乙酯也可使用，但長期儲存其穩(wěn)定性可能成為問題。儲存過久的溶液也應(yīng)定期替換。

表2-7 官方分析化學(xué)家協(xié)會(AOAC)方法的總流程

(5)內(nèi)標(biāo)物選擇非常重要。首先確定樣品中不含此物，在LC-MS/MS或GC-MS條件下完全回收。在本方法中，一種廉價的稀釋液dl0-對硫磷用作內(nèi)標(biāo)液。稀釋的毒死蜱或甲基毒死蜱也適應(yīng)寬范圍的選擇性GC檢測器，但是價格非常昂貴。有時也可用些不常用的化合物作內(nèi)標(biāo)物，但是其穩(wěn)定性必須認真考察。

(6)在此方法中，最多250種農(nóng)藥能被添加配成溶液。如果單個溶液均以甲苯為溶劑，那么混合液將由100%甲苯組成，這樣對校正標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備是不理想的。標(biāo)準(zhǔn)溶液可以用乙腈制備，但對一些農(nóng)藥而言可降低其穩(wěn)定性。盡管在0.1%乙酸溶液中穩(wěn)定性大大改善，但降解是不可避免的。一個可供選擇的方法，是通過在相同進樣瓶中溶解多種農(nóng)藥參照品來制備農(nóng)藥混合物。

(7)三苯磷酯酸酯(TPP)工作液用乙腈溶液制備，主要因為步驟3加入的乙腈溶液中含有1%醋酸，后續(xù)步驟中可提高某些農(nóng)藥的穩(wěn)定性。

(8)如果樣品脂肪量超過1%，添加同等數(shù)量PSA吸附劑用作分散固相萃取。隨著脂肪量的增加，第三相(乳化層)將形成，由于部分非極性農(nóng)藥進入第三層導(dǎo)致回收率大大下降。多數(shù)非極性農(nóng)藥(如滴滴涕)在約5%脂肪量時的回收率小于70%，但對極性較強的氣譜分析或液譜分析的農(nóng)藥而言，當(dāng)脂肪量高于15%時也能完全回收。

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